家禽病毒性传染病疫苗的生产应用虚拟仿真实验

实验教学项目

1.实验原理

      (1)病毒的鸡胚培养:鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的动物病毒的一种培养方法,此方法可用以进行多种病毒的分离、培养以及疫苗的制备等。鸡胚培养技术无饲养管理及隔离等的特殊要求,且一般无病毒隐性感染,同时它的敏感范围很广,多种病毒均能适应,因此,是常用的一种培养动物病毒的方法。

      (2)弱毒疫苗:指一种病原致病力减弱但仍具有活力的完整病原疫苗,也就是用人工致弱或自然筛选的弱毒株,经培养后制备的疫苗。优点是病原可在免疫动物体内繁殖,用量小,免疫原性好,免疫期长,成本低,使用方便。

      (3)灭活疫苗:对病毒或细菌进行培养后用加热或化学剂(通常是福 尔马林)将其灭活。灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成,也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。灭活疫苗使受种者产生以体液免疫为主的免疫反应,它产生的抗体有中和、清除病原微生物及其产生的毒素作用,对细胞外感染的病原微生物有较好的保护效果。

      (4)抗体效价检验方法---血凝和血凝抑制实验:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某些动物的红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝反应(HA)。当病毒的悬液中加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接接触,这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制反应(HI),也叫血凝抑制反应。

      (5)抗体效价检验方法---酶联免疫吸附实验:原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合。酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

      (6)点眼、滴鼻免疫:点眼、滴鼻是使疫苗通过上呼吸道或眼结膜进入体内的一种接种方法,适用于新城疫Ⅳ系疫苗、传染性支气管炎疫苗及传染性喉气管炎疫苗的接种。这种接种方法尤其适合于幼雏、产蛋期的家禽。点眼、滴鼻法要逐只进行,保证每只家禽都得到剂量一致的免疫,免疫效果确定,抗体水平整齐。此法为弱毒疫苗接种的最佳方法。

      (7)饮水免疫:饮水法适用于大型养禽场,家禽数量多,逐只免疫时费力,对禽群影响较大,且不能在短时间内达到整群免疫。饮水免疫目前主要用于鸡新城疫Ⅳ系疫苗、传染性支气管炎H120及传染性气管炎H52疫苗、传染性法氏囊病弱毒疫苗的免疫。

      (8)喷雾免疫:气雾法用压缩空气通过气雾发生器使稀释疫苗形成直径1~10微米的雾化粒子,均匀地浮游于空气之中随呼吸而进入家禽体内。

      (9)皮下注射免疫:皮下注射时疫苗通过毛细血管和淋巴系统吸收,疫苗吸收缓慢而均匀,维持时间长。多采用颈背部皮下注射。

      (10)肌肉注射免疫:肌肉注射此法作用迅速,尤其是种禽最好采用此法。灭活疫苗最好采用肌肉注射法,不能口服,也不能用于点眼、滴鼻。肌肉注射时,以翅根部肌肉为好,进针时针头稍倾斜。也可采用胸部肌肉注射,但进针时不要垂直刺入,以免伤及肝脏、心脏。